Tìm kiếm

Quảng cáo

Hỗ trợ kĩ thuật

Quảng cáo

Thống kê

  • truy cập   (chi tiết)
    trong hôm nay
  • lượt xem
    trong hôm nay
  • thành viên
  • Chào mừng quý vị đến với Thư viện Bài giảng điện tử.

    Quý vị chưa đăng nhập hoặc chưa đăng ký làm thành viên, vì vậy chưa thể tải được các tư liệu của Thư viện về máy tính của mình.
    Nếu đã đăng ký rồi, quý vị có thể đăng nhập ở ngay ô bên phải.

    sinh học phân

    Nhấn vào đây để tải về
    Báo tài liệu có sai sót
    Nhắn tin cho tác giả
    (Tài liệu chưa được thẩm định)
    Nguồn: google
    Người gửi: Quế Mộc Thoại My
    Ngày gửi: 18h:58' 04-03-2017
    Dung lượng: 2.0 MB
    Số lượt tải: 3
    Số lượt thích: 0 người
    Trường Đại Học Nông Lâm
    Môn: Sinh Học Phân Tử
    Các phương pháp chuyển gen vào tế bào
    nhận và ứng dụng của chuyển gen
    Lớp: KHCT 50
    Nhóm: 06
    GVHD:
    Danh sách nhóm:
    Nguyễn Văn Luân
    Thái Thị Mỹ Uyên
    Lê Xuân Thiện
    Trần Quang Trung
    Trần Công Vĩnh
    Trần Văn Đạt
    Arat Khải
    Giới thiệu
    Kĩ thuật chuyển gen
    Các phương pháp chuyển gen
    Một số ứng dụng và thành tựu
    Nội dung chính
    1. Giới thiệu
    Có nhiều phương pháp làm biến đổi hệ gen của sinh vật, nhưng chủ yếu bằng 3 cách:
    Khái niệm chung
    Biến nạp gen ở thực vật là quá trình chuyển một hoặc một số gen ngoại lai vào trong tế bào thực vật nhằm tạo ra một tính trạng mới mà trước đó cơ thể thực vật đó không có.
    Mục đích chuyển gene ở thực vật
    Nghiên cứu và làm sáng tỏ chức năng của một gen quan tâm.
    Làm thay đổi mức độ biểu hiện của một gene nội bào.
    Chuyển các gen quy định các tính trạng mong muốn vào TB để thu nhận TB mới và cây chuyển gen.



    2. Kĩ thuật chuyển gene trên thực vật
    3. Các phương pháp chuyển gene trực tiếp

    Chuyển gene bằng súng bắn gene

    Súng bắn gen (Gene gun) là một thiết bị sử dụng để đưa thông tin di truyền vào tế bào, được thiết kế đầu tiên cho biến nạp DNA ngoại lai vào tế bào thực vật.

    Nguyên lý chung của phương pháp này là sử dụng áp lực của xung khí helium để đẩy các viên đạn có kích thước nhỏ mang các gene mong muốn (các viên đạn này thường được làm bằng Au, Tungsten, titanium hoặc volfram), xuyên qua các lớp tế bào, mô để xâm nhập vào genome thực vật.
    Ưu điểm:
    Có thể chuyển gene vào nhiều loại tế bào và mô.
    Bắn một lần được nhiều tế bào.
    Quá trình chuyển gen nhanh, thao tác đơn giản.
    Các vector mang gene tái tổ hợp đơn giản và chỉ cần một lượng vector nhỏ.
    Nhược điểm:
    Đòi hỏi thiết bị đắt tiền (không phải phòng thí nghiệm nào cũng có thể đầu tư).
    Có thể gây ra sự xáo trộn trật tự của đối tượng chuyển gen.
    Tần số biến nạp ổn định thấp.



    Chuyển gene bằng xung điện
    Khái niệm:
    Là phương pháp sử dụng xung điện trong thời gian ngắn để tạo ra các lỗ trên màng tế bào trần làm cho DNA bên ngoài môi trường có thể xâm nhập vào bên trong tế bào.


    Ưu điểm
    Phương pháp này có thể thực hiện với các mô in vivo còn nguyên vẹn.
    Ðoạn DNA ngoại lai được biến nạp có kích thước lớn.



    Nhược điểm:
    Tỷ lệ các tế bào được chuyển gene còn thấp.
    Sức sống của tế bào giảm đột ngột khi bị sốc điện.
    Việc tái sinh ở một số loài rất khó khăn.



    Chuyển gene trực tiếp nhờ hóa chất
    Là phương pháp chuyển gene vào protoplast (tế bào trần) nhờ các chất hóa học như polyethylene glycol (PEG) hoặc canxi phosphat.
    Nguyên tắc

    Khi có sự tác động của hóa chất thì màng của protoplast bị thay đổi và protoplast có thể thu nhận DNA ngoại lai vào bên trong tế bào.
    Ở nồng độ cao, PEG làm ADN cần biến nạp không còn ở trạng thái hoà tan nữa mà kết dính lại trên màng sinh chất. Sau đó, bằng cách loại bỏ PEG và xử lý nồng độ cao của Ca2+ hoặc ở độ pH cao, ADN biến nạp sẽ được chuyển nạp vào trong tế bào protoplast.
    Ưu điểm:
    Hiệu quả chuyển gen cao, ổn định nếu quá trình biến nạp thành công.
    Không đỏi hỏi thiết bị đắt tiền.

    Nhược điểm:
    Tần số chuyển gene rất thấp do không kiểm soát được quá trình chuyển gene.
    Dễ xảy ra hiện tượng dung hợp TB trần, gây khó khăn trong việc phân tích biểu hiện gene.
    Tái sinh tế bào trần sau chuyển gene khó khăn.
    Chuyển gene bằng vi tiêm
    Khái niệm:

    Chuyển gene bằng vi tiêm là chuyển gene trực tiếp vào tế bào protoplast hoặc TB đơn ( chưa hình thành vỏ cứng) bằng cách sử dụng vi tiêm nhỏ, kính hiển vi và các vi thao tác.
    Nguyên tắc
    Nguyên tắc của phương pháp vi tiêm là một lượng nhỏ DNA được tiêm trực tiếp vào nhân tế bào phôi trần hoặc tế bào nguyên vẹn một cách cơ học dưới kính hiển vi.
    Phương pháp này cho phép đưa gen vào đúng vị trí mong muốn ở từng tế bào với hiệu quả tương đối cao.
    Ưu điểm:
    Có thể tối ưu lượng DNA đưa vào tế bào
    Quyết định được đưa DNA vào loại tế bào nào
    Có thể đưa một cách chính xác thậm chí vào tận nhân và có thể quan sát được
    Các tế bào có cấu trúc nhỏ như hạt phấn và tế bào tiền phôi mặc dù hạn chế về số lượng cũng có thể tiêm chính xác
    Có thể nuôi riêng lẻ các tế bào vi tiêm và biến nạp được vào mọi giống cây
    Nhược điểm:
    Mỗi lần tiêm chỉ được một phát tiêm và chỉ với một tế bào
    Cần dùng các thiết bị có độ chính xác cao và cần kỹ năng phức tạp của người sử dụng
    Chuyển gene qua ống phấn
    Khái niệm
    Là phương pháp chuyển không qua nuôi cấy invitro, các DNA ngoại lai được chuyển trực tiếp bằng đường ống phấn.



    Nguyên tắc
    DNA ngoại lai chuyển vào cây theo đường ống phấn, chui vào bầu nhụy cái. Thời gian chuyển gene là vào lúc hạt phấn mọc qua vòi nhụy và lúc đưa tinh vào thụ tinh.
    Thời điểm chuyển gene tốt nhất là xảy ra đúng khi quá trình thụ tinh ở noãn và cho tế bào hợp tử chưa phân chia. Như vậy sự chuyển gene chỉ xảy ra ở một tế bào cái duy nhất


    Chuyển gene bằng kĩ thuật siêu âm
    Khái niệm: Dùng sóng siêu âm để chuyển gene vào tế bào trần.
    Nguyên tắc:
    - Sau khi tạo protoplast, ta tiến hành trộn protoplast với plasmid chứa gene mong muốn tạo dung dịch huyền phù.
    - Tiến hành cắm đầu máy siêu âm vào dung dịch huyền phù khoảng 3mm và cho máy phát với tần số 20kHz, thời gian 600- 900 ms.
    - Sóng siêu âm làm cho lớp màng protoplast biến đổi tạo ra các lỗ giúp cho DNA ngoại lai xâm nhập vào tế bào.
    Các bước:
    Tạo dung dịch tế bào huyền phù

    Tạo sóng siêu âm với tần số cao

    Protoplast bị thủng một số chỗ

    ADN thâm nhập vào

    Nuôi cấy protoplast

    Tái sinh cây

    Chọn lọc cây chuyển gene
    Ưu điểm:
    Chuyển được lượng protoplast nhiều.
    Không độc hại đối với tế bào.

    Nhược điểm:
    Giá thành thiết bị tương đối cao.
    Đòi hỏi kỹ thuật cao.
    4. Một số ứng dụng và thành tựu


    Tạo các giống cây trồng có năng suất cao, chất lượng tốt.
    Đảm bảo ổn định đa dạng sinh học.
    Sử dụng hiệu quả nguồn nguyên liệu từ bên ngoài cho nông nghiệp và môi trường.

    ỨNG DỤNG

    Thành tựu
    Một số sản phẩm chuyển gen
    Khoai tây
    Cà chua chín chậm
    Củ cải đường chịu rét
    Lúa sống chung với lũ
    Ngô và đậu tương kháng thuốc diệt cỏ
    Cây bông chuyển gen
    kháng sâu Bt
    Đu đủ kháng virut
    Thêm sắc hoa xanh
    Cẩm chướng
    Hoa hồng
    THANK YOU FOR LISTENING
    Trong tương lai có thể tạo ra các thực vật chuyển gene tạo ra vaccine có thể ăn được.

    Những thực vật này nhận kháng nguyên từ vi sinh vật hay loài kí sinh rồi nhiễm vào đường tiêu hóa của người và một ngày nào đó con người có thể đưa ra cách chữa bệnh an toàn, rẻ tiền và cung cấp vaccine trên toàn thế giới.
    Triển vọng
    Trong tương lai chuối chuyển gene được coi như là một lọai nồi phản ứng sinh học mang kháng nguyên để thay thế cho vaccine phòng chống bệnh viêm gan B do HBV gây nên, điều này người ta đã làm thành công ở khoai tây và cà chua.
    Chuối vaccine
    Nhờ công nghệ biến đổi gene, loài cây vốn gây nhiều vấn đề sức khỏe đối với con người có thể trở thành nguồn cung cấp nhiên liệu sinh học cho các động cơ.

    Một loại cây thuốc lá chuyển gen có khả năng phát hiện bom mìn cũng đang trong giai đoạn nghiên cứu.
    Cây thuốc lá chuyển gen


    Dự kiến tới đây người ta còn tạo ra một số cây trồng khác mang gen có thể bẻ gãy gene RDX thành các chất metalotes, không độc và sử dụng như các nguồn nitơ.

    RDX là một chất gây nổ độc hại, một loại hợp chất gây độc cả nguồn đất lẫn nguồn nước và tự nó rất khó phân hủy trong môi trường tự nhiên.
     
    Gửi ý kiến