CHÀO MỪNG
CÁC EM ĐẾN VỚI
BUỔI THỰC HÀNH
1

THỬ TÀI ĐOÁN VẬT

Chọn một dụng cụ hoặc mẫu vật,
sau đó nêu tên và dự đoán vai trò,
cách sử dụng từng loại dụng cụ,
mẫu vật đó.
2

BÀI 2
THỰC HÀNH
TÁCH CHIẾT DNA
3

NỘI DUNG
1. Chuẩn bị
2. Cơ sở khoa học tách chiết DNA
3. Thực hành tách chiết DNA
4. Báo cáo kết quả thực hành
4

I. Chuẩn bị
1. Dụng cụ

Cối - chày sứ

Ống nghiệm,
giá đỡ

Vải lọc
(hoặc rây)

Pipette

Dao nhỏ

Đĩa đồng hồ

Cốc - đũa
thuỷ tinh

Que tre nhỏ

5

I. Chuẩn bị
2. Hóa chất

Nước
rửa bát

Nước
cất lạnh

Cồn ethanol
Dung dịch
70 % lạnh diphenylamine

6

I. Chuẩn bị
3. Mẫu vật

Cải thìa

Xà lách

Gan
(gà, lợn)

Quả dứa
còn xanh

7

II. Cơ sở khoa học
Nêu cơ sở khoa học của việc tách chiết DNA?
- Ở tế bào nhân thực, DNA tập trung chủ
yếu trong nhân tế bào, một số nằm trong
các bào quan (ti thể, lục lạp). DNA trong
nhân liên kết với nhiều loại protein khác
nhau, được bao bọc bởi màng nhân.
8

II. Cơ sở khoa học
- Người ta có thể dùng các phương pháp cơ
học, hoá học để phá vỡ thành tế bào, màng
sinh chất và màng nhân  Giải phóng DNA
ra khỏi tế bào.
 Thu nhận được DNA tinh sạch phục vụ
cho các nghiên cứu di truyền.
9

III. Cách tiến hành
01

02

03
04

Quy trình chung tách
chiết ADN

Chuẩn bị mẫu vật
- Dịch chiết nước dứa.
- Dịch chiết mô (thực vật hay động
vật).chiết DNA
Tách
Loại bỏ các thành phần không mong muốn
để giải phóng DNA.
Kết tủa DNA
Để thu nhận được DNA từ các tế bào của mô.
Nhận biết DNA
Quan sát DNA hoặc nhận biết bằng thuốc

11

III. Cách tiến hành
Bước 1: Chuẩn bị mẫu vật
Dịch chiết nước dứa
Gọt vỏ quả dứa và cắt thành những lát mỏng, nhỏ
 Cho vào cối sứ nghiền nhuyễn  Lọc lại bằng vải
hoặc rây  Thu được dịch chiết nước dứa.

12

III. Cách tiến hành
Bước 1: Chuẩn bị mẫu vật
Dịch chiết mô
Cắt nhỏ 100g gan (hoặc cải) còn tươi + 200mL nước cất
lạnh  Cho vào cối sứ nghiền nhuyễn (20s); Lọc lại bằng
vải hoặc rây  Thu được dịch chiết mô.

13

III. Cách tiến hành
Bước 2: Tách chiết DNA ra khỏi tế bào

Rót dịch chiết mô vào cốc thủy tinh  Thêm 30mL nước rửa
bát (hỗn hợp A); Dùng đũa khuấy  để yên trong 10 - 15
phút  Dùng pipette hút 5mL hỗn hợp A cho vào ống
nghiệm; Sau đó thêm 1mL dịch chiết nước dứa (hỗn hợp
B)  Dùng đũa khuấy nhẹ hỗn hợp B rồi để yên trong 30
14

III. Cách tiến hành
Bước 3: Kết tủa DNA
Nghiêng ống nghiệm chứa hỗn hợp B, rót từ từ theo
thành ống 5mL dung dịch cồn ethanol 70% lạnh sao cho
cồn tạo thành lớp nổi trên bề mặt  Đặt ống nghiệm
đứng thẳng trên giá, để yên 5 phút  Thấy xuất hiện búi
kết tủa trắng đục chứa DNA nằm lơ lửng trong lớp cồn.
15

III. Cách tiến hành
Bước 4: Nhận biết DNA
Dùng tăm tre nhỏ đưa vào trong lớp cồn, khuấy thật nhẹ
cho búi DNA bám vào que tre  Vớt ra quan sát  Kiểm
chứng sự có mặt của DNA: Cho búi DNA vào trong đĩa
đồng hồ, nhỏ vào 1mL dung dịch diphenylamine  Sau
một thời gian búi màu trắng dần chuyển sang màu xanh.
16

IV. Báo cáo kết quả thực hành

17

IV. Báo cáo kết quả thực hành

Các nhóm báo cáo
sản phẩm

Sản phẩm
nhóm 1

Sản phẩm
nhóm 2

Sản phẩm
nhóm 3

Sản phẩm
nhóm 4

18

Nhận xét, đánh giá

- Các nhóm tiến hành đánh giá các thành viên trong nhóm.
- GV nhận xét và đánh giá kết quả thực hành của các nhóm.

19

20

21

HƯỚNG DẪN VỀ NHÀ
- Ôn tập và trả lời các câu hỏi.
- Chuẩn bị bài 3. Điều hòa biểu hiện gene

22