Sở GD - ĐT Thái Nguyên
Trường THPT Bắc Sơn

Bài 27: Thực hành
Một số thí nghiệm về enzim





GV: Ngô Văn Dương
Bắc Sơn, ngày 20 tháng 03 năm 2008
I. Mục tiêu:
- Học sinh làm được thí nghiệm về ảnh hưởng của nhiệt độ, độ pH đối với enzim và thí nghiệm về tính đặc hiệu của enzim, trên cơ sở đó củng cố kiến thức về enzim.
- Rèn luyện kỹ năng làm thí nghiệm, tư duy sáng tạo cho học sinh.
Chia lớp thành 6 nhóm.
Chuẩn bị đầy đủ dụng cụ, mẫu vật, hoá chất cho 6 nhóm.
Với thí nghiệm 2 liên quan đến thuốc thử và tương đối khó giáo viên cần chuẩn bị từ trước.
Giáo viên cần làm trước thí nghiệm để làm thí nghiệm đối chứng cho học sinh.
II. Chuẩn bị:
1. Nguyên liệu và hoá chất:
Dung dịch iôt 0,3%, axit HCl 5%, nước bọt pha loãng 2 - 3 lần.
Dung dịch saccaraza nấm men, dung dịch tinh bột 1%, saccarôzơ 4%, thuốc thử lugol, thuốc thử phêlinh.

2. Dụng cụ:
ống nghiệm, đèn cồn, lọ đựng hoá chất, tủ ấm hoặc nước nóng, máy ly tâm ( phễu lọc ), giấy lọc và các dụng cụ khác.
III. Cách tiến hành:
1. Thí nghiệm về ảnh hưởng của nhiệt độ, pH đối với hoạt tính của enzim amilaza.
Bước 1: Lấy 4 ống nghiệm, cho vào mỗi ống 2ml dung dịch tinh bột 1%.
Đặt ống 1 vào nồi cách thuỷ đang sôi.
Đặt ống 2 vào cốc nước ấm 40 độ.
Đặt ống 3 vào nước đá.
Cho vào ống 4, 1ml dung dịch HCl 1%
Bước 2: Sau 5 phút cho vào mỗi ống nghiệm 1 ml dung dịch amilaza pha loãng, để khoảng 15 phút.
Bước 3: Dùng dung dịch iốt 0,3% để xác định mức độ thuỷ phân tinh bột ở 4 ống.
2. Thí nghiệm về tính đặc hiệu của enzim:
Bước 1: Lấy 4 ống nghiệm.
Cho vào ống 1và 2 mỗi ống 1ml dung dịch tinh bột 1%.
Cho vào ống 3 và 4 mỗi ống 1ml dung dịch saccarozo 4%.
Cho vào ống 1và 3 mỗi ống 1ml nước bọt pha loãng
Cho vào ống 2 và 4 mỗi ống 1ml dung dịch saccaraza nâm men
Bước 2: Đặt cả 4 ống nghiệm trong nước ấm 40 độ trong 15 phút. Sau đó nhấc ra.
Cho vào ống 1và 3 mỗi ống 3 giọt thuốc thử lugol.
Cho vào ống 2 và 4 mỗi ống1ml thuốc thử phêlinh.
Sau đó đun trên đén cồn đến khi sôi.
Bước 3: Quan sát màu sắc các ống nghiệm và giải thích.
IV. Thu hoạch:
Điền kết quả vào bảng và giải thích:
1. Thí nghiệm 1: ảnh hưởng của nhiệt độ, độ pH đến hoạt tính của enzim.
1. Thí nghiệm 2: Thí nghiệm về tính đặc hiệu của enzim.
Quan sát và giải thích:
Màu xanh
Không màu
Màu xanh
Màu xanh
Enzim bị biến tính bởi nhịêt độ nên không có khả năng xúc tác phân giải tinh bột vì vậy tinh bột tác dụng với iốt tạo màu xanh
Tinh bột đã bị enzim amilaza phân giải hết nên khi cho thuốc thử iốt vào không thấy có màu xanh
Enzim bị biến tính bởi nhịêt độ nên tinh bột không bị phân giải thành đường đã tác dụng với iốt tạo màu xanh
Enzim bị biến tính bởi axit nên tinh bột không bị phân giải thình đường đã tác dụng với iốt tạo màu xanh
Quan sát và giải thích:
Tinh bột
Tinh bột
Saccarozo
Saccarozo
Saccaraza
Saccaraza
Amilaza
Amilaza
Lugol
Lugol
Phêlinh
Phêlinh
Không màu
Không màu
Có màu
Có màu